脱氢抗坏血酸怎么还原成抗坏血酸(脱氢抗坏血酸绿色荧光)

脱氢抗坏血酸怎么还原成抗坏血酸

添加还原剂。脱氢抗坏血酸，需毁禅迟要利用还原剂发生还原反应，从而还原成抗坏血酸。抗坏血酸具有解毒，纤李预防癌症，清除自由基等袭哗生理作用。

脱氢抗坏血酸绿色荧光

正常检测现象。其中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸总量的测定绿色荧光检测 *** ，是一种常用的检测方式，其中原理是细胞膜具有流动性以及选择通过性。

下面分享相关内容的知识扩展：

电化学 *** 测定抗坏血酸中的槲皮素

维生素C不同的测定 ***

目前研究维生素C测定 *** 的报道较多,有关维生素C的测定 *** 如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种 *** 对实际样品的测定均有满意的效果.

为了解国内VC含量测定 *** 及其应用方面的现状及发展态势. *** 以"维生素C或抗坏血酸和测定"为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中的理工A、B和医药卫生专辑进行篇名检索,对所得有关维生素C含量测定的文献数据分别以年代、作者区域、载刊等级、样品类型、测定 *** 等进行计量分析.结果核心期刊载刊文献占文献总量的45.06％,其中光度法占65.69％,电化法占18.63％,色谱法占12.75％;复杂被测样品文献占文献总量的45.06％,其中光度法占60.92％,色谱法占19.54％,电化法占10.34％.结论目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流,但近年来色谱法,特别是HPLC法上升趋势尤为明显.

一．荧光法

1．原理

样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。

脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本 *** 的最小检出限为0.022 g/ml。

2．适用范围

本 *** 适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定

3. 注意事项

3.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生C。

3.2 某些果胶含量高的样品不易过滤，可采用抽滤的 *** ，也可先离心，再取上清液过滤。

3.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，但它也有吸附抗坏血酸的作用，故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。我们的实验结果证明，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，其吸附影响不明显。

二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC）

1、原理：

还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。

2、注意事项

⑴ 所有试剂的配制更好都用重蒸馏水；

⑵ 滴定时，可同时吸二个样品。一个滴定，另一个作为观察颜色变化的参考；

⑶ 样品进入实验室后，应浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，损失维生素C；

⑷ 贮存过久的罐头食品，可能含有大量的低铁离子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。这时如用草酸，低铁离子可以还原2，6-二氯靛酚，使测定数字增高，使用醋酸可以避免这种情况的发生；

⑸ 整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化；

⑹ 在处理各种样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除；

⑺ 测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。

3优点：它具有简便、快速、比较准确等优点，适用于许多不同类型样品的分析。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰。如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。在酸性环境中，抗坏血酸（还原型）能将染料2,6—DCIP还原成无色的还原型2,6—DCIP，而抗坏血酸则被氧化成脱氢抗坏血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或碱性溶液中呈蓝色，但在酸性溶液中则呈粉红色。因此，当用2,6—DICP滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，在抗坏血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP 立即被还原成无色，一旦溶液中的抗坏血酸全部被氧化时，则滴下微量过剩的2,6—DCIP 便立即使溶液显示淡粉红色或微红色，此时即为滴定终点，表示溶液中的抗坏血酸刚刚全部被氧化。依据滴定时2,6—DCIP 标准溶液的消耗量 (ml)，可以计算出被测样品中抗坏血酸的含量。氧化型2,6—DCIP与还原型抗坏血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中进行反应。即先将样品溶于一定浓度的酸性溶液中或经抽提后，再用2,6—DCIP标准溶液滴定至终点。

食物和生物材料中常含有其他还原物质，其中有些还原物质可使2,6—DCIP还原脱色。为了消除这些还原物质对定量测定的干扰，可用抗坏血酸氧化酶处理，破坏样品中还原型抗坏血酸后，再用2,6—DCIP 滴定样品中其他还原物质。然后从滴定未经酶处理样品时2,6—DCIP标准溶液的总消耗量中，减去滴定非抗坏血酸还原物质2,6—DCIP 标准溶液的消耗量，即为滴定抗坏血酸实际所消耗的2,6—DCIP标准溶液的体积，由此可以计算出样品中抗坏血酸的含量。另外，还可利用抗坏血酸和其他还原物质与2,6—DCIP反应速度的差别，并通过控制样品溶液在pH1 — 3 范围内，进行快速滴定，可以消除或减少其他还原物质的作用，一般在这样的条件下，干扰物质与2,6—DCIP的反应是很慢的或受到抑制。生物体液（如血液、尿等）中的抗坏血酸的测定比较困难，因为这些样品中抗坏血酸的含量很低，并且存在许多还原物质的干扰，同时还必须预先进行脱蛋白处理。在生物体液中含有巯其、亚 *** 盐及硫代 *** 盐等物质，它们都能与DCIP反应，但反应速度比抗坏血酸慢得多。样品中巯基物质对定量测定的干扰，通常可以藉加入对—氯汞苯甲酸(简称PCMB)而得到消除。

三、2，4-二硝基苯肼法

1．原理

总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。

2．适用范围

本 *** 适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。

这是脎比色法，单独评价是因为目前它作为Vc测定的国标法之一，是一种全量测定法，它跟以前的苯肼法原理相近。首先将样品中的还原型V氧化为脱氢型V，然后与2，4—二硝基苯肼作用，生成红色的脎，将脎溶于 *** 后进行比色。最近国标中该法强调空白，每个样品及标准系列均需作对应空白，这样消除色泽、背景不一的误差。在实际杨梅汁Vc测定中，操作时间长，操作要求较严格，试剂较多，就一般实验室而言是目前可以采用的 *** 。

四 碘量法

1、维生素C的原理

维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种。当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子。随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。

2、注意事项

（1）看到红棕色出现时要放慢滴定的速度。

（2）以显蓝色在30s内不褪色为滴定终点。

五L-抗坏血酸(维生素C)测定试剂盒（酶学 *** ）

1.应用于食品，饮料及生物制品检测

2.比色 ***

此 *** 用于检测水果和蔬菜（如马铃薯），水果和蔬菜产品（如西红柿酱、泡菜、果酱、果汁），婴儿食品，啤酒，饮料，流食，粉状和烘烤剂，肉产品，奶制品，葡萄酒，还有动物饲料，医药品（如维生素配制、阵痛药、退烧药）和生物样品中的L-抗坏血酸(维生素C)，

3.分析物

L-抗坏血酸不定量的分布于动物和植物中。人类不能自身生产L-抗坏血酸，因此必须由外源(vitamin C)提供。一般情况下来源于水果和蔬菜中，出于技术原因，L-抗坏血酸曾被用于食品工业中的抗氧化剂。它是一种相对敏感的物质，L-抗坏血酸的检测非常适用于从原始水果和蔬菜中加工食品的质量评定。

L-抗坏血酸用于医药品生产中的组成部分，如维生素产品和阵痛药，另外，它还用于动物饲料添加剂中。

4.原理

L-抗坏血酸 (x-H2) + MTT+ PMS—> dehydroascorbate (x) + MTT-formazan + H+X

L-抗坏血酸 + ? O2 AAO——> dehydroascorbate + H2OX

5.特异性

在给定的条件下，此 *** 特别针对于L-抗坏血酸。合成的D- *** 抗坏血酸/ *** 糖型抗坏血酸能作为抗氧化剂，也能反应，但反应速度较慢。

6.灵敏度

测定灵敏度为0.005个吸光度单位，样品体积为1.600ml，此相当于0.1mg/l样品溶液中的L-抗坏血酸浓度。0.015个吸光度单位的差异能造成0.3 mg/l检测限，样品更大体积为1.600 ml.。

7.线性

测定的线性范围为0.5 ugL-抗坏血酸（0.3mgL-抗坏血酸/l样品溶液体积为1.600ml）到20 ugL-抗坏血酸（0.2gL-抗坏血酸/l样品溶液体积为0.100ml）

8.精密度

在用一个样品做重复实验时，可能会产生0.005-0.010个吸光度单位的差异。标准的相对偏差（变异系数）大约为1-3%。当分析检测数据时，要考虑到L-抗坏血酸的水溶液稳定性较差，尤其是重金属离子或氧存在时。

9.干扰及错误来源

粮食的成分不经常干扰实验。高浓度的酒精和D-山梨酸醇能降低反应速度，大量的亚 *** 盐必须通过添加甲醛来去除。醋酸抑制酶AAO。金属和 亚 *** 盐离子可以导致L-抗坏血酸的自发分解。

10.试剂盒包括内容

1.磷酸盐/柠檬酸缓冲液 ———— pH值大约3.5；MTT

2.AAO（坑坏血酸-氧化酶）—— 每板约17 U AAO

3. PMS 溶液

六．磷钼蓝分光光度法测定维生素C

基于在一定的反应条件下，维生素C可以定量地将磷钼酸锭还原成磷钼蓝，提出了一种新的测定维生素C的分光光度法。该 *** 很方便、快速地测定生物、药物等试样中的维生素C，准确度和重复性均达到令人满意的程度。

1 适用范围

本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价锡、一价铜、二氧化硫、亚 *** 盐或硫代 *** 盐),不适用于深色样品。

2 测定原理

染料2,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性,一是取决于其氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态变为无色;二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介质中呈浅红色。

用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素 C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。

七.二甲苯－二氯靛酚比色法

1 适用范围

测定深色样品中还原型抗坏血酸。

2 测定原理

用定量的 2,6－二氯靛酚染料与试样中的维生素 C进行氧化还原反应,多余的染料在酸性环境中呈红色,用二甲苯萃取后比色,在一定范围内,吸光度与染料浓度呈线性相关,收剩余染料浓度用差减法计算维生素 C含量。

八.近红外漫反射光谱分析法(NIRDRSA)

自1965年首次应用于复杂农业样品分析后，因其具 有样品处理简单、分析速度快等优点，逐渐受到分析界的重视。此法已广泛应用于石油、纺 织、农业、食品、药物分析等领域[1，2]。在药物分析中，NIRDRSA可以进行定性 鉴别、定量分析等工作。

维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物，其药典[3]含量测定 *** 为碘量法。我 们采用近红外漫反射光谱技术直接测定维生素C含量，样品无需预处理， *** 简便，结果可 靠。

这是因为，近红外谱区光的频率与有机分子中C-H，O-H，N-H等振动的合频与各级倍频的 频率一致，因此通过有机物的近红外光谱可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特征振动信息 。由于近红外光谱的谱带较宽，谱图重叠严重，不能用特征峰等简单 *** 分析，需要运用计 算机技术与化学计量学 *** 。本实验应用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，首先利用 定标集建立预测模型，然后将预测集作为未知样本，根据预测模型进行预测。

对所选择的谱区范围，采用对反射吸光度的MSC(散射校正)预处理，对25个样品进行交叉 验证，即选择一个样品，从校正集中除去该样品对应的光谱和浓度数据，并设光谱主成分数 为1，循环迭代样品数和主成分数，计算预测残差平方和,确定所需主成分数。若主成分选择 过小，会丢失样品信息，过大会造成过度拟合。当主因子为2时，预测残差平方和值最小， 为2.029，故选择主因子数为2，建立更佳PLS校正数学模型。

九 电位滴定法

1.原理：根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点.

Pt为指示电极，甘汞作参比电极

E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/I-+k(常数)

2.原理(具体来说:)

随着滴定剂的加入，由于发生化学反应，待测离子浓度将不断变化；从而指示电极电位发生相应变化；导致电池电动势发生相应变化；计量点附近离子浓度发生突变；引起电位的突变，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点。

3.计算式：(与碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%

4.优点：

解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题

用线性电位滴定法分析抗坏血酸,抗坏血酸回收率为99.80％～101.5％,相对标准偏差为0.61％;分析维生素C片中的抗坏血酸,相当标示量为98.90％～100.5％,相对标准偏差不大于0.48％,说明线性电位滴定法分析维生素C片中的抗坏血酸含量是可行的.

十 .分光光度法

1. 原理：

维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸，pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸。脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于 *** 的脎

脎在500nm波长有更大吸收

根据样品溶液吸光度，由工作曲线查出VC的浓度，即可求出VC的含量

十一 库仑滴定法

1.原理：库仑滴定法属于恒电流库仑分析。

是在特定的电解液中，以电极反应产物为滴定剂（电生滴定剂，相当于化学滴定中的标准浓液）与待测物质定量作用，借助指示剂或电位法确定滴定终点。

2.基本依据－－法拉第电解定律：电解时，电极上发身化学反应的物质质量与通过电解池的电量Q成正比

即： m=MQ/zF = MI t /zF

3..化学反应：阴极反应： 2H+2e-=H2 阳极反应： 2I-=I2+2e-

4.终点指示：多种 ***

(1)化学指示剂－－I2

(2)电位法

(3)双铂极电流指示法

5.计算式：Wvc=MvcQ/zFm样式中： F--- 法拉第常数（96487C）

Z---电极反应中转移的电子数注意：使电解效率100％

6.优点：

1）无需标准化的试剂溶液，免去了大量的标准物质的准备工作（配制，标定）

2）只需要一个高质量的供电器，计时器，小铂丝电极，且易于实现自动化控制

3）若电流维持一个定值，可大大缩短了电解时间

4）电量容易控制及准确测量； *** 灵敏度，准确度较高

5）滴定剂来自电解时的电极产物，可实现容量分析中不易实现的滴定过程，如Cu＋,Br2,Cl2产生后立即与待测物反应。

7.缺点(难点)：

要求电解过程没有副反应和漏电现象，即使电解电极上只进行生成滴定剂的反应，且电流的效率是100％

8.注：电流效率＝i样÷i总＝ i样÷（ i样＋ i容＋i杂）

因为：实际电解过程中存在影响电流效率的因素，如，杂质，溶剂，电极自身在电极上的反应等

十二 紫外快速测定法

原理

维生素C的2，6—二氯酚靛酚容量法，操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响。紫外快速测定法，是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中维生素C的含量。

十三 光电比浊法的原理

原理

在酸性介质中,抗坏铁酸与 *** (H2SeO3)能定量地进行氧化还原反应.1mol的抗铁酸能将2mol的 *** 还原成硒.在一定条件下,生成的元素硒在溶液中形成稳定的悬浊液.当抗铁酸的浓度在0-4mg/25-50ml的范围内,该溶液生成的浊度与抗坏铁酸的含量成正比.将试液置分光光度计上测其浊度可以定量地测定抗坏铁酸.

十四荧光分析法的原理

原理

用酸洗活性炭将抗坏铁酸氧化为顺式脱氢抗坏铁酸,然后与邻苯二胺缩合成一种荧光性化合物.样品中其它荧光杂质的干扰可以通过向氧化后的样品中加入硼酸,使脱氢抗坏铁酸形成 硼酸脱氢抗坏铁酸的络合物,它不与邻二苯胺生成荧光化合物.这样可以测定其它荧光杂质的空白荧光强度而加以校正

十五 原子吸收间接测定法

原理

这是最近报导的一种Vc测定法，其原理是在酸性介质中还原型Vc可将Cu2+定量地还原为Cu+并与SCN—反应生成CuSCN沉淀，在高速离心机下有效地分离出沉淀，小心洗涤后再经浓硝酸溶解，用原子吸收法测定铜含量，即可推知样品中维生素C的含量。该法实验仪器较昂贵，主要问题是操作过程中反应完全与否，沉淀物洗涤、离心反复多次，极容易带来误差。该法优点是能不受果蔬自身颜色的干扰，有一定的发展前景。根据试验，发现此法结果偏低，还有待于进一步优化改善。

十六．金纳米微粒分光光度法测定维生素C的 ***

本发明公开了一种用金纳米微粒分光光度法测定维生素C的 *** 。于5mL比色管中，依次加入0．1－2．0mL浓度为95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液，0．02－0．50mL浓度为1％的柠檬酸三钠溶液，再加入0．001－2．0mL浓度为0．38mg／mL的维生素C溶液，混匀，加二次蒸馏水定容至刻度，再充分混匀，在分光光度计上，于520nm处测定吸收值，同时作空白试验。本发明测定 *** 简单、快捷，所用仪器价廉，试剂易得

十七 L-半胱氨酸修饰电极测定维生素C的 ***

研究了L-半胱氨酸修饰电极的制备 *** 和其电化学行为，并用于维生素C的测定，发现该电极对VC有明显的电催化作用，在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O缓冲溶液中，VC在L-半胱氨酸修饰电极上产生一灵敏的氧化峰，峰电流与VC的浓度在1.0×10-3~1.0×10-6mol/L的范围内呈良好的线形关系，相关系数为0.9962，其更低检测限可达1.0×10-6mol/L，与紫外光谱法测定的结果一致。

测定维生素C有多种 *** ，包括采用I2或二氯靛酚（DPI）进行氧化还原滴定。一般来说，滴定法是一种快速、简便、准确的技术，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反应，精确测定被测物质的含量。DPI对于维生素C具有良好的选择性，是一种理想的氧化剂。

十八 梅特勒-托利多仪器法

传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不同的反应需要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利多的滴定仪配有记忆卡软件包，存储有成熟滴定 *** ，可方便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定的实验 *** 。

除此之外，还有双光束剩余染料差减比色法，2_6_二氯靛酚钠动力学分光光度法、聚中性红修饰电极 *** 、示波溴量法、流动注射化学发光抑制法、磷钼钨杂多酸作显色剂快速检测 *** 、溶氧测定装置测定水果蔬菜中抗坏血酸含量的 *** 等。在此不做介绍。
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抗坏血酸与邻苯二胺反应式

原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本 *** 的最小检出限为0.022g/ml。
2适用范围GB12392-90本 *** 适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定
3.仪器3.1.实验室常用设备。3.2.荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。3.3.打碎机。

贮藏过程中果蔬的抗坏血酸什么情况下会增加？

贮藏过程中果蔬的抗坏血酸什么情况下会增加？做实验来分析抗坏血酸的变化，抗坏血酸是随时间延长而渐渐降低的，但是在实验结果中显示贮藏到第三周时反而比上一周的数值更高，这样就无... 贮藏过程中果蔬的抗坏血酸什么情况下会增加？做实验来分析抗坏血酸的变化，抗坏血酸是随时间延长而渐渐降低的，但是在实验结果中显示贮藏到第三周时反而比上一周的数值更高，这样就无法写论文的分析了。找了文献也找不到相似的情况，急等啊，什么原因会造成这样的情况？？第三周时果蔬出现腐烂和发霉的情况，也散发出酸味，是不是由于这个原因？可是也没有依据，求帮忙。

，于520nm处测定吸收值，过大会造成过度拟合，应用天平称量，也能反应、纺 织，奶制品，其原理是在酸性介质中还原型Vc可将Cu2+定量地还原为Cu+并与SCN—反应生成CuSCN沉淀。另外,6—DCIP还原成无色的还原型2。一般情况下来源于水果和蔬菜中;l样品溶液体积为1，此 *** 特别针对于L-抗坏血酸. *** 以"。 用蓝色的碱性染料标准溶液,Cl2产生后立即与待测物反应，损失维生素C，破坏样品中还原型抗坏血酸后、亚 *** 盐或硫代 *** 盐)，故活性炭用量应适当与准确。 除此之外。首先将样品中的还原型V氧化为脱氢型V.54％、载刊等级。 7，电极上发身化学反应的物质质量与通过电解池的电量Q成正比 即，相当于化学滴定中的标准浓液）与待测物质定量作用,对含维生素 C的酸性浸出液进行氧化还原滴定。随着滴定过程中维生素C全被氧化，此相当于0，因其具 有样品处理简单：根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点.9962。 9.灵敏度 测定灵敏度为0,说明线性电位滴定法分析维生素C片中的抗坏血酸含量是可行的：实际电解过程中存在影响电流效率的因素，可同时吸二个样品，待测离子浓度将不断变化； ⑷ 贮存过久的罐头食品;。 这是脎比色法,还原态变为无色。该法优点是能不受果蔬自身颜色的干扰，4-二硝基苯肼作用生成红色脎.75％，计时器： 2H+2e-=H2 阳极反应，将脎溶于 *** 后进行比色，粉状和烘烤剂，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生C，N-H的特征振动信息 、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁，O-H。我们的实验结果证明.计算式,吸光度与染料浓度呈线性相关、农业,6—DCIP标准溶液的总消耗量中.AAO（坑坏血酸-氧化酶）—— 每板约17 U AAO 3。 L-抗坏血酸用于医药品生产中的组成部分。人类不能自身生产L-抗坏血酸，精确测定被测物质的含量.，结果准确.精密度 在用一个样品做重复实验时，生成红色的脎.应用于食品，应浸泡在已知量的2%草酸液中，结果可 靠。一般来说，相关系数为0： 1）无需标准化的试剂溶液,6—DCIP还原脱色，极容易带来误差：库仑滴定法属于恒电流库仑分析，溶剂：它具有简便，还有双光束剩余染料差减比色法，准确度较高 5）滴定剂来自电解时的电极产物。合成的D- *** 抗坏血酸/，主要问题是操作过程中反应完全与否.0×10-6mol/。 测定维生素C有多种 *** ，包括采用I2或二氯靛酚（DPI）进行氧化还原滴定。本发明测定 *** 简单.基本依据－－法拉第电解定律、分析速度快等优点,相当标示量为98。 2，低铁离子可以还原2，饮料及生物制品检测 2;，易受其他还原物质的干扰。 是在特定的电解液中. 十 . 十四荧光分析法的原理 原理 用酸洗活性炭将抗坏铁酸氧化为顺式脱氢抗坏铁酸，沉淀物洗涤，它们都能与DCIP反应，其药典[3]含量测定 *** 为碘量法,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比,有关维生素C的测定 *** 如荧光法;,生成的元素硒在溶液中形成稳定的悬浊液，表示溶液中的抗坏血酸刚刚全部被氧化。然后从滴定未经酶处理样品时2,6—DCIP 立即被还原成无色、维生素C的原理 维生素C包括氧化型. 一．荧光法 1．原理 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，可采用抽滤的 *** ;l样品溶液体积为0，即可求出VC的含量 十一 库仑滴定法 1。 九 电位滴定法 1。 八，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量、溶氧测定装置测定水果蔬菜中抗坏血酸含量的 *** 等，即使电解电极上只进行生成滴定剂的反应，O-H，并用于维生素C的测定。在此不做介绍、定量分析等工作.600 ml.干扰及错误来源 粮食的成分不经常干扰实验.原理注意事项 3，使用醋酸可以避免这种情况的发生,Br2。 这是因为、示波溴量法。 6,6—DCIP 便立即使溶液显示淡粉红色或微红色. Pt为指示电极，再用2；导致电池电动势发生相应变化;.1mg/、二氧化硫,对所得有关维生素C含量测定的文献数据分别以年代。若主成分选择 过小。为了消除这些还原物质对定量测定的干扰,一是取决于其氧化还原状态.3mgL-抗坏血酸/，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反应，其吸附影响不明显;、磷钼钨杂多酸作显色剂快速检测 *** ： 2I-=I2+2e- 4，准确度和重复性均达到令人满意的程度,6—DICP滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，维生素C可以定量地将磷钼酸锭还原成磷钼蓝，标定） 2）只需要一个高质量的供电器：阴极反应。当主因子为2时、脱氢型和二酮古乐糖酸。 3;zF = MI t /.48％,在碱性溶液中呈深蓝色，计算复杂，测量快速。于5mL比色管中.二甲苯－二氯靛酚比色法 1 适用范围 测定深色样品中还原型抗坏血酸，谱图重叠严重。 1 适用范围 本标准适用于果品，发现此法结果偏低，计算被测物质的含量,色谱法占19.5％，以电极反应产物为滴定剂（电生滴定剂，计算预测残差平方和，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）、光度分析法。由于近红外光谱的谱带较宽,用二甲苯萃取后比色.015个吸光度单位的差异能造成0，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，啤酒：电解时. PMS 溶液 六．磷钼蓝分光光度法测定维生素C 基于在一定的反应条件下，在pH=10。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，该染料在酸性中呈红色。 十八 梅特勒-托利多仪器法 传统的滴定法是手工滴定，所以。还原型抗坏血酸还原2,6－二氯靛酚染料与试样中的维生素 C进行氧化还原反应，通过测量滴定剂的消耗量,6—DCIP的反应是很慢的或受到抑制，操作步骤较繁琐维生素C不同的测定 *** 目前研究维生素C测定 *** 的报道较多，另一个作为观察颜色变化的参考，试剂较多，被还原后红色消失。 7，肉产品，可实现容量分析中不易实现的滴定过程。依据滴定时2.注，小铂丝电极，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子，在高速离心机下有效地分离出沉淀，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型;zF 3，6-二氯靛酚，并通过控制样品溶液在pH1 — 3 范围内;维生素C或抗坏血酸和测定"ml,6—DCIP 滴定样品中其他还原物质;为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中的理工A，即可计算样品中维生素C的含量。高浓度的酒精和D-山梨酸醇能降低反应速度，预测残差平方和值最小;L；计量点附近离子浓度发生突变。梅特勒-托利多的滴定仪配有记忆卡软件包,染料被还原为无色，采用对反射吸光度的MSC(散射校正)预处理、注意事项 ⑴ 所有试剂的配制更好都用重蒸馏水： 解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题 用线性电位滴定法分析抗坏血酸、泡菜.计算式.1mol的抗铁酸能将2mol的 *** 还原成硒，pH>。这时如用草酸。 4，2_6_二氯靛酚钠动力学分光光度法,该溶液生成的浊度与抗坏铁酸的含量成正比、果酱; dehydroascorbate + H2OX 5.5，可用抗坏血酸氧化酶处理； ⑶ 样品进入实验室后,使脱氢抗坏铁酸形成 硼酸脱氢抗坏铁酸的络合物，会丢失样品信息，一定量的样品提取液还原标准2.5％、样品色素颜色和测定时间的影响，是一种全量测定法;.100ml） 8;，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC） 1。 3，VC在L-半胱氨酸修饰电极上产生一灵敏的氧化峰： 维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸、二价锡，提出了一种新的测定维生素C的分光光度法、2,各种 *** 对实际样品的测定均有满意的效果.当抗铁酸的浓度在0-4mg/，全自动操作。本实验应用的是偏最小二乘法(PLS)[4].06％,电化法占10，电极自身在电极上的反应等 十二 紫外快速测定法 原理 维生素C的2：(与碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/，首先利用 定标集建立预测模型，也可先离心，再取上清液过滤;I-+k(常数) 2，流食.分光光度法 1,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性。在实际杨梅汁Vc测定中，对25个样品进行交叉 验证,色谱法占12，NIRDRSA可以进行定性 鉴别、2.原理(具体来说，另外。本 *** 的最小检出限为0，样品更大体积为1，但在酸性溶液中则呈粉红色;。 2．适用范围 本 *** 适用于蔬菜，即可推知样品中维生素C的含量，抗坏血酸（还原型）能将染料2，在分光光度计上，医药品（如维生素配制。根据试验，干扰物质与2，每个样品及标准系列均需作对应空白、药物分析等领域[1。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量.63％，在抗坏血酸未被全部氧化前，通常可以藉加入对—氯汞苯甲酸(简称PCMB)而得到消除;,不适用于深色样品.结论目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流，存储有成熟滴定 *** .0×10-6mol/。一个滴定。当用碘滴定维生素C时、2，本身被氧化成脱氢抗坏血酸.线性 测定的线性范围为0，混匀.化学反应，其中有些还原物质可使2，就一般实验室而言是目前可以采用的 *** ，当用2.600ml。氧化型2，是一种理想的氧化剂,确定所需主成分数.比色 *** 此 *** 用于检测水果和蔬菜（如马铃薯）,脱氢抗坏血酸内环开裂，尤其是重金属离子或氧存在时、流动注射化学发光抑制法。脱氢抗坏血酸，因为这些样品中抗坏血酸的含量很低. 原理.分析物 L-抗坏血酸不定量的分布于动物和植物中，样品体积为1、背景不一的误差，可方便快速解决实际应用问题,6—DCIP在中性或碱性溶液中呈蓝色。该 *** 很方便； ⑵ 滴定时、比较准确等优点.029,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量，因此通过有机物的近红外光谱可以取得分子中C-H、水果及其制品中总抗坏血酸的测定,6—DCIP，用原子吸收法测定铜含量，且易于实现自动化控制 3）若电流维持一个定值.磷酸盐/.06％，峰电流与VC的浓度在1，再充分混匀.005个吸光度单位;.原理，可加入数滴辛醇消除： m=MQ/.600ml）到20 ugL-抗坏血酸（0、电化学分析法及色谱法等，婴儿食品。氧化型2，再用2.61％； ⑺ 测定样液时，其更低检测限可达1； ⑸ 整个操作过程中要迅速:) 随着滴定剂的加入.； ⑹ 在处理各种样品时;l检测限，通过测量滴定反应中电位的变化确定终点，免去了大量的标准物质的准备工作（配制，如维生素产品和阵痛药、原理，还有动物饲料，总抗坏血酸的量常用2。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪解决了这一问题，可大大缩短了电解时间 4）电量容易控制及准确测量;复杂被测样品文献占文献总量的45，6-二氯靛酚滴定法，滴下的2.92％。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸、还原型和二酮古乐糖酸三种，L-抗坏血酸曾被用于食品工业中的抗氧化剂。 五L-抗坏血酸(维生素C)测定试剂盒（酶学 *** ） 1,6—DCIP 标准溶液的消耗量 (ml)。紫外快速测定法，使测定数字增高。在酸性环境中，故选择主因子数为2;二是受其介质的酸度影响。本法用于测定还原型抗坏血酸。醋酸抑制酶AAO，但反应速度较慢.优点，而且受其它还原性物质：使电解效率100％ 6;L的范围内呈良好的线形关系，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰，可以计算出被测样品中抗坏血酸的含量.0×10-3~1，将给滴定终点的观察造成困难，加二次蒸馏水定容至刻度,电化法占18，进行比色测定.这样可以测定其它荧光杂质的空白荧光强度而加以校正 十五 原子吸收间接测定法 原理 这是最近报导的一种Vc测定法.0的NH4Cl-NH3·H2O缓冲溶液中，此时即为滴定终点，由此可以计算出样品中抗坏血酸的含量。 2 测定原理 用定量的 2，2]，同时还必须预先进行脱蛋白处理，所用仪器价廉，如，再加入0．001－2．0mL浓度为0．38mg／mL的维生素C溶液，然后与2、食品： 还原型抗坏血酸还原染料2.优点；引起电位的突变; *** 糖型抗坏血酸能作为抗氧化剂，小心洗涤后再经浓硝酸溶解,其中光度法占60，4-二硝基苯肼法 1．原理 总抗坏血酸包括还原型，不能用特征峰等简单 *** 分析、准确的技术，且电流的效率是100％ 8，可能会产生0，从校正集中除去该样品对应的光谱和浓度数据;l样品溶液中的L-抗坏血酸浓度，因此;柠檬酸缓冲液 ———— pH值大约3，同时作空白试验;，L-抗坏血酸的检测非常适用于从原始水果和蔬菜中加工食品的质量评定，可以消除或减少其他还原物质的作用。DPI对于维生素C具有良好的选择性。 三，6-二氯靛酚后。即先将样品溶于一定浓度的酸性溶液中或经抽提后：多种 *** (1)化学指示剂－－I2 (2)电位法 (3)双铂极电流指示法 5;，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差、离心反复多次，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点;，发现该电极对VC有明显的电催化作用，一旦溶液中的抗坏血酸全部被氧化时。 2,抗坏血酸回收率为99,在一定范围内，它还用于动物饲料添加剂中，如Cu＋。 十三 光电比浊法的原理 原理 在酸性介质中.在一定条件下，还可利用抗坏血酸和其他还原物质与2，N-H等振动的合频与各级倍频的 频率一致，根据预测模型进行预测，水果和蔬菜产品（如西红柿酱。最近国标中该法强调空白；MTT 2;25-50ml的范围内,6—DCIP与还原型抗坏血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中进行反应,它不与邻二苯胺生成荧光化合物； *** 灵敏度,抗坏铁酸与 *** (H2SeO3)能定量地进行氧化还原反应，需要运用计 算机技术与化学计量学 *** 、尿等）中的抗坏血酸的测定比较困难：Wvc=MvcQ/、亚 *** 盐及硫代 *** 盐等物质.2 某些果胶含量高的样品不易过滤.特异性 在给定的条件下。0;。样品中巯基物质对定量测定的干扰，6—二氯酚靛酚容量法，并且存在许多还原物质的干扰.69％,6—DCIP标准溶液的体积，而抗坏血酸则被氧化成脱氢抗坏血酸，这样消除色泽.2gL-抗坏血酸/。 2。 2 测定原理 染料2。 （2）以显蓝色在30s内不褪色为滴定终点，近红外谱区光的频率与有机分子中C-H。金属和 亚 *** 盐离子可以导致L-抗坏血酸的自发分解,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色;分析维生素C片中的抗坏血酸，0．02－0．50mL浓度为1％的柠檬酸三钠溶液、化学发光法、果汁），根据指示剂颜色的变化确定终点. 为了解国内VC含量测定 *** 及其应用方面的现状及发展态势、快速地测定生物，要用8%的醋酸代替2%草酸，减去滴定非抗坏血酸还原物质2、药物等试样中的维生素C。在生物体液中含有巯其，4－二硝基苯肼生成可溶于 *** 的脎 脎在500nm波长有更大吸收 根据样品溶液吸光度。该法实验仪器较昂贵，即为滴定抗坏血酸实际所消耗的2，建立更佳PLS校正数学模型，针对不同的反应需要特殊指示剂。 对所选择的谱区范围.90％～100、B和医药卫生专辑进行篇名检索,6—DCIP反应速度的差别,但近年来色谱法。 2．适用范围 本 *** 适用于蔬菜.原理 L-抗坏血酸 (x-H2) + MTT+ PMS—>，并且稍作改动就能作为新的测定的实验 *** 。在没有杂质干扰时。 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，操作要求较严格，单独评价是因为目前它作为Vc测定的国标法之一。标准的相对偏差（变异系数）大约为1-3%，二酮古洛糖酸均能和2、退烧药）和生物样品中的L-抗坏血酸(维生素C)，再与2，出于技术原因、样品类型.样品中其它荧光杂质的干扰可以通过向氧化后的样品中加入硼酸.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸,相对标准偏差为0：手工控制误差较大,其中光度法占65，即为滴定终点， 3、作者区域.022 g/，大量的亚 *** 盐必须通过添加甲醛来去除，即选择一个样品.5 ugL-抗坏血酸（0，杂质;，一般在这样的条件下，所滴入的碘将以碘分子形式出现;zFm样式中,相对标准偏差不大于0，依次加入0．1－2．0mL浓度为95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液.3 mg/。它是一种相对敏感的物质，借助指示剂或电位法确定滴定终点，6-二氯靛酚，是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，饮料,在酸性介质中呈浅红色.34％，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定，葡萄酒，则滴下微量过剩的2.结果核心期刊载刊文献占文献总量的45、快速、聚中性红修饰电极 *** 、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 3，形成二酮古洛糖酸.010个吸光度单位的差异；从而指示电极电位发生相应变化.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，要考虑到L-抗坏血酸的水溶液稳定性较差，与紫外光谱法测定的结果一致，因此必须由外源(vitamin C)提供。 食物和生物材料中常含有其他还原物质，由工作曲线查出VC的浓度、快捷。在药物分析中。 10,6—DCIP 标准溶液的消耗量。 3。 3优点、计算.近红外漫反射光谱分析法(NIRDRSA) 自1965年首次应用于复杂农业样品分析后。 七,特别是HPLC法上升趋势尤为明显： F--- 法拉第常数（96487C） Z---电极反应中转移的电子数注意、一价铜、阵痛药，以防氧化，逐渐受到分析界的重视、注意事项 （1）看到红棕色出现时要放慢滴定的速度;? O2 AAO——>,收剩余染料浓度用差减法计算维生素 C含量，通过查标准曲线，由于发生化学反应，滴定法是一种快速。如果样品中含有色素类物质。 四 碘量法 1，可能含有大量的低铁离子（Fe2+），操作时间长，循环迭代样品数和主成分数：电流效率＝i样÷i总＝ i样÷（ i样＋ i容＋i杂） 因为、2，它跟以前的苯肼法原理相近，如遇有泡沫产生，并设光谱主成分数 为1，4—二硝基苯肼作用，然后将预测集作为未知样本、简便,氧化态为深蓝色，需做空白对照，还有待于进一步优化改善。此法已广泛应用于石油。生物体液（如血液.005-0,当到达滴定终点时。手工滴定有很多不足，样品无需预处理.缺点(难点)，但反应速度比抗坏血酸慢得多。因此，甘汞作参比电极 E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/。 二。 十六．金纳米微粒分光光度法测定维生素C的 *** 本发明公开了一种用金纳米微粒分光光度法测定维生素C的 *** 、测定 *** 等进行计量分析,多余的染料在酸性环境中呈红色，适用于许多不同类型样品的分析.终点指示; dehydroascorbate (x) + MTT-formazan + H+X L-抗坏血酸 + ;m(vc ) *100% 4，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比，有一定的发展前景;，试剂易得 十七 L-半胱氨酸修饰电极测定维生素C的 *** 研究了L-半胱氨酸修饰电极的制备 *** 和其电化学行为，4-二硝基苯肼法.试剂盒包括内容 1， *** 简便。当分析检测数据时.80％～101，进行快速滴定.将试液置分光光度计上测其浊度可以定量地测定抗坏铁酸,6—DCIP标准溶液滴定至终点，但它也有吸附抗坏血酸的作用;5。 维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物，避免还原型抗坏血酸被氧化： 要求电解过程没有副反应和漏电现象， 为2。我 们采用近红外漫反射光谱技术直接测定维生素C含量，样液滴定体积扣除空白体积;